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VRE显色培养基(含增补剂)说明书

发布时间: 2021-06-23  点击次数: 1148次

VRE显色培养基(含增补剂)说明书

VRE显色培养基(含增补剂)说明书

法国科玛嘉VRE显色培养基

用于耐万古霉素粪肠球菌(E.faecalis)和尿肠球菌(E.faecium)的鉴定和计数。

组分

琼脂                               15.0g/L

蛋白胨和酵母浸出物                 20.0 g/L

色素                               27.3 g/L

盐类                               5.0 g/L

PH                                6.8±0.2

根据需要,可以进行经典配方的调整或补充。

操作

  1. 称取瓶内干粉67.3g,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可以按照67.3 g/L的比例扩大或 缩小。
  2. 将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,充分搅拌直至琼脂*溶解。
  3. 加热至100℃,并且不断搅拌。如果使用高压锅,请不要加压,加热不能超过100℃。使用微波炉加热时,在煮沸后马上移出微波炉并不断搅拌,而后移入微波炉再加热,直至*溶解(大气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
  4. 把VRE基础培养基冷却至45-50℃备用,此基础培养基为乳白色。
  5. 取增补剂一瓶,加入1ml 54%酒精溶解,以无菌操作把增补剂加入到备用的基础培养基中,轻轻混合均匀(使其终浓度为60mg/L),避免气泡,也可按照60mg/L的比例扩大或缩小 。
  6. 使用倾注程序:准备直径为90mm的已灭菌的带盖培养皿,每个培养基接种1ml样品,然后倾注混合均匀的培养基 15±1ml,混合均匀使其凝固,倒置,37℃培养16小时 ,24小时 和48小时,观察结果 。
  7. 如果使用表面接种程序:将培养基倾注于已灭菌的培养皿中(用前贮存于2-8℃,避光,接种前应先恢复至室温)。样品划线接种或者涂布接种于 培养基表面,在37℃培养18小时,24小时和48小时,观察结果。

贮存

1、法国科玛嘉VRE显色培养基干粉需保存在15-30℃干燥环境中,增补剂保存于2-8℃环境下。

2、倾注好的培养基在室温可保存一天,2-8℃冰箱中避光可以贮存两星期。

结果

微生物

菌落颜色

VRE粪肠球菌 、尿肠球菌

VRE鸡肠球菌、铅黄肠球菌

其他革兰氏阳性细菌

革兰氏阴性菌

玫瑰色至紫色

蓝色或被抑制

被抑制

被抑制

★ 极少数其他菌属菌株如乳酸杆菌素可能呈现很小的紫色菌落。

★ 使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。

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