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Gibco液体培养基的配置方法和操作步骤说明

发布时间: 2022-09-24  点击次数: 603次
   Gibco液体培养基的配置方法:
  1、配料:配方换算→在容器中加入少量水→按照配方称取各种药品→加足所需水量。
 
  2、溶解:
  淀粉溶解:少量冷水调成糊状
  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃,且需要边
  加热边搅拌以防止烧焦。
 
  3、调pH:用1N的盐酸或的1NNaOH把培养基调节到所要求的值。
 
  4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。
 
  5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
 
  6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
 
  7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
 
  8、摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
 
  9、贮存:培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
 
  Gibco液体培养基的操作步骤:
  1、准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
 
  2、校正ph值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度。
 
  3、过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
 
  4、分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内,塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备。
 
  5、培养基的,常用高压蒸汽法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽才能达到的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽比干热法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸取水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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