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Invitrogen反转录酶III主要特点

发布时间: 2017-05-24  点击次数: 979次
Invitrogen反转录酶III是以RNA为模板引导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。

Invitrogen反转录酶III缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的Invitrogen反转录酶III。用1微克的mRNA起始合成*条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的Invitrogen反转录酶III的作用。
 
Invitrogen反转录酶III主要特点
Invitrogen反转录酶III都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。
①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。Invitrogen反转录酶III中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。
②RNase H活性;由Invitrogen反转录酶III催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子。
③DNA引导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的*条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。
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